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荧光素标记毒蕈碱型乙酰受体抗体滨驳骋样本的物种 应选择物种相同或有交叉反应的抗体,抗体可能与不同物种的同种靶蛋白有交叉反应,因其氨基酸序列同源性较高,如果样本的种类未列入抗体说明书上的交叉反应种属表中,并不意味着该抗体不适用于检测该物种的蛋白,而只是表示该物种尚未用此抗体检测验证过,应通过序列比对的方法来预测交叉反应,可应用Expasy 和 NCBI BLAST 来进行不同物种蛋白同源性比对。
荧光素标记毒蕈碱型乙酰受体抗体滨驳骋一抗宿主物种的选择一般说来,在使用偶联二抗结合无偶联物的一抗时,一抗宿主动物的物种选择较为重要,对于免疫组化而言,尽可能选择与样本不同种系物种的一抗,从而避免二抗与样本内源性免疫球蛋白产生交叉反应,例如:检测小鼠样本蛋白,则不应选择小鼠或麻花传媒MV一二三区别源的一抗,选兔源的一抗,则二抗则可选择偶联了检测分子(酶、荧光素、等)的抗兔IgG。如果选择有偶联物的一抗则不适用上述情况,除免疫组化外的其它对不含内源性免疫球蛋白样本的检测方法,则抗体宿主物种的影响不大,如对不含IgG 的细胞裂解物样本的western blotting检测,尽管如此,含有血清的组织裂解物和组织培养上清中含有免疫球蛋白,还原变性样本中含IgG,在western blot 检测中则结合出现IgG 分子50 and 25 kDa 的重链和轻链条带。二抗的选择 二抗应选用与使用的一抗相同的物种来源,例如:如果你的一抗是小鼠的单克隆抗体,二抗则选抗小鼠的二抗anti-mouse secondary。建议检查二抗说明书确保该抗体适用于你的检测应用, 二抗一般连接荧光素FITC 或发光团。
上海谷研生物科技有限公司特殊抗体的保存条件:. 酶联抗体:永远保存在4 度,避免冻起来。否则会导致酶活性的下降或者丧失2. 偶联抗体:所有偶联抗体都是在棕色管中或使用锡箔纸避光保存。尤其是荧光抗体,对光极为敏感,因此在所有的实验阶段也是要避光操作的!3. IgG3 的同型对照:永远保存在4 度,避免冻起来。因为如果出现冻融过程,该抗体非常容易形成多聚体无论是保存还是运输,避免反复冻融!反复冻融会导致抗体变性,导致多聚体形成,从而降低抗体的结合能力!
对于加入甘油保存:有些人会加50%的甘油到抗体中来避免反复冻融,甘油在-20 度 会降低冰点。这对很多抗体可能是可行的。但是abcam 仅对非常小的一部分抗体检测过其在这种条件下的稳定性;而abcam 只对按照条件保存的抗体提供质量保证!加入甘油的溶液不建议在-80 度保存,因为这已经超过了甘油的冰点。如果您要加入甘油来保存抗体的话,请谨慎注意无菌操作,避免污染!对于蛋白保护剂:蛋白在高浓度时更不容易降解( mg/ml 或者更高),这就是为什么在抗体中加入BSA 之类作为稳定剂的原因了;另一方面,加入的蛋白也可以减少抗体由于管壁吸附所造成的损失。但是如果抗体要用来标记的话,则不能加入蛋白稳定剂,因为这些稳定剂会和抗体一起竞争结合标记物。
其它相关信息:
// TE-0(食管癌细胞)
HTB-22 ZR-75-30(乳腺癌细胞)
// TE-(食管癌细胞)
HTB-33 Bcap-37(乳腺癌细胞)
HTB-33 Eca-09(食管癌细胞)
// MDA-MB-453(乳腺癌细胞)
HTB-30 CNE(鼻咽癌细胞)
HTB-30 JAR(胎盘绒毛癌细胞)
// HEp-2(喉表皮样癌细胞)
CRL-504 NIH:OVCAR-3(卵巢癌细胞)
// KB(口腔表皮样癌细胞)
// SK-OV-3(卵巢癌细胞)
// Acc-3(涎腺腺样囊性癌细胞)
HTB-3 HO-890PM(高转移卵巢癌细胞)
// Acc-2(涎腺腺样囊性癌细胞)
HTB-44 HO-890(卵巢癌细胞)
CCL-23 Tca-83(舌鳞癌细胞)
HTB-6 HCC 94 [HCC9422](子宫鳞癌细胞(高分化))
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